اینٹی سائکلک سائٹرولینیٹڈ پیپٹائڈ (سی سی پی) اینٹی باڈی ایلیسا کٹ

یہ کٹ بالواسطہ طریقہ کی بنیاد پر انسانی سیرم کے نمونوں میں اینٹی سائکلک citrullinated پیپٹائڈ اینٹی باڈیز (CCP اینٹی باڈیز) کا پتہ لگاتی ہے، جس میں کوٹنگ اینٹیجن کے طور پر استعمال ہونے والے پیوریفائیڈ سائکلک citrullinated پیپٹائڈ اینٹی جنز کے ساتھ۔

جانچ کا عمل سیرم کے نمونے کو رد عمل کے کنوؤں میں شامل کرنے کے ساتھ شروع ہوتا ہے جو مذکورہ بالا پیوریفائیڈ اینٹیجنز کے ساتھ پہلے سے لیپت کیے گئے ہیں، اس کے بعد انکیوبیشن کی مدت ہوتی ہے۔ اس انکیوبیشن کے دوران، اگر سی سی پی اینٹی باڈیز نمونے میں موجود ہوں، تو وہ خاص طور پر مائیکرو ویلز پر لیپے ہوئے سائکلک citrullinated پیپٹائڈ اینٹیجنز کو پہچانیں گے اور ان سے منسلک ہوں گے، مستحکم اینٹیجن-اینٹی باڈی کمپلیکس بنائیں گے۔ بعد کے مراحل کی درستگی کو یقینی بنانے کے لیے، رد عمل کے کنویں میں موجود غیر پابند اجزاء کو دھونے کے عمل کے ذریعے ہٹا دیا جاتا ہے، جو سیرم میں موجود دیگر مادوں کی ممکنہ مداخلت کو ختم کرنے میں مدد کرتا ہے۔

اس کے بعد، انزائم کنجوگیٹس کو رد عمل کے کنویں میں شامل کیا جاتا ہے۔ دوسرے انکیوبیشن کے بعد، یہ انزائم کنجوگیٹس خاص طور پر موجودہ اینٹیجن-اینٹی باڈی کمپلیکس سے منسلک ہو جائیں گے، جس سے ایک بڑا مدافعتی کمپلیکس بنتا ہے جس میں اینٹیجن، اینٹی باڈی، اور انزائم کنجوگیٹ شامل ہوتے ہیں۔ جب ٹی ایم بی سبسٹریٹ سلوشن سسٹم میں متعارف کرایا جاتا ہے، تو کنجوگیٹ میں موجود انزائم ٹی ایم بی سبسٹریٹ کے ساتھ کیمیائی رد عمل کو اتپریرک کرتا ہے، جس کے نتیجے میں رنگ میں تبدیلی نظر آتی ہے۔ اس رنگ کے رد عمل کی شدت کا براہ راست تعلق اصل سیرم کے نمونے میں موجود CCP اینٹی باڈیز کی مقدار سے ہے۔ آخر میں، ایک مائکروپلیٹ ریڈر کا استعمال رد عمل کے مرکب کی جاذبیت (A قدر) کی پیمائش کے لیے کیا جاتا ہے۔ اس جذب قدر کا تجزیہ کرکے، نمونے میں سی سی پی اینٹی باڈیز کی سطح کا درست تعین کیا جاسکتا ہے، جو متعلقہ طبی جانچ اور تشخیص کے لیے ایک قابل اعتماد بنیاد فراہم کرتا ہے۔